镇原县阿斯巴甜
发现了。
使用产物沉淀法，当L - PheOMe过贵时在水溶液反应也能有很髙的得率， 其中Z - L - Asp - L - PheOMe与L - PheOMe形成不溶性沉淀。各取底物 2?10mL水中混合，并加人10mg嗜热菌蛋ft酶，起始pH6~8，在 概保持3 ~5h可得到Z-L-Asp-L-PheOMe ? L - PheOMe白色沉淀，该沉淀 得率大于95%。研究还发现，以外消旋化合物为反应底物时，只有L-PheOMe 参与缩合反应得到产物为Z-L-Asp-L-PheOMe，但D - PheOMe也能与Z-L- Asp-L-PheOMe形成沉淀。根据这些研究结果，Tosoh公司开发了生产工艺流程 (图2-20)，并在1984年完成了中试。
该表达系统以产朊假丝酵母(CandUla utihs)为莫奈林基因的宿主细胞，采 用的GAP启动子，对的核糖体蛋甶L41基W进行体外突变得到 的放线菌酮Uycloheximide, CYH)抗性基因作为标记基因，质粒构建后再线性 化，以多拷W整合至宿主染色体进行表达。
CH, CH,
在这之后，偶然又发现L-3三氟乙酰氨基-/V-琥珀酰二苯胺[丨29]和
<130*0 该法以甲苯为原料与氣磺酸进行氣 磺化时，有近一半的对甲苯磺酰氣副产 物生成，邻甲苯磺酰氣胺化成邻甲苯磺 酰胺的收率仅为75%?78%，因此，甲 苯法生产糖梢钠的总收率不足40%。 安赛蜜的急性口服毒性是很低的，可以 认为没有这方面毒性。按6.9~8.0g/kg体重 标准进行口服试验测得半数致死世 2. 2g/kg体重；人们用含安赛蜜0% ~ 10%浓 度的饲料饲养白鼠90(丨进行亚慢性毒理试验， 1970年的报道认为，这种植物的块茎可用来繁殖再生，但用核发芽未能取 得成功。后来，英国Reading大学用核发芽繁殖取得成功。但令人奇怪的是，核 发芽长出的都是雄花植株，即使娃雌性植株的块茎长出的也楚雄性植株，这就极 大地抑制了英国为培育新品种以期结出具有特定甜蛋白结构的浆果而付出的巨大 努力。据报道，加纳用黑核发芽也取得成功，但未提及所繁殖的植株性别。 发现比较晚的Brazzein由于具有耐热性，而且甜味高，因而有望大规模生 产。美国Kelcakr Worldwide公司已经可以利用含有Brazzein基因的玉米生产 Brazzein,据称丨I重组玉米中可以提取1 kg的Brazzein,但迄今为止还没有这方面 的确切报道。