乐平市水苏糖
美国Baldwin-Montrose化学公司曾采用此法。此法原料便宜易得，反应条 件温和，但反应操作复杂。日本日东化学公司曾改以环己胺和三氧化硫的气相反 应合成甜蜜素。我国徐光保等采用FJ3N为原料，CH2C,2为溶剂，结晶母液套 用，九次循环试验表明，收率为95.2%。
糖精在人体内不发生代谢作用，这点似乎已经很明确r。然而，最近也有数 篇文献报道发现过糖精的代谢产物，但是这钱报道发现糖精代谢物的测定方法与 步骤有些问题，令人怀疑。
有别于其他C族G蛋A偶联受体的是，甜味受体为异型二聚体。一些研究 人员猜测，TIRs (特别是T1R3)很有可能就是甜味受体，并且可能像其他C族 G蛋白偶联受体一样形成同型二聚体。但是，几个月后，Li等便证明了只有异型 二聚体T1H2 -T1R3才具有甜味受体的功能。T1R3的序列有20%与mGluRs的 相同。在人们发现甜味受体的时期，mGluR8是惟一一种结构已被人们至少部分 了解了的C族G蛋白偶联受体。正是人们对mGluRlN端结构的了解，促成了首 个甜味受体同源模型的建立。类似于mGhiRl，这个模型为两条T1R3链的同型 二聚体。不久后，—个类似的模型表明，T1R3的活性位点可以容纳三个甜度极 高的小分子质量分子。
三、蔗糖的氯代衍生物
Neoculin分子中的8个半胱氨酸残基均参与形成二硫键，因此异型二聚体当 中有4个二硫键[图5-26 (1)]。其中，两个是亚基内二硫键（位于每一亚基 的Cys29和Cys52之间），另外两个是亚基间二硫键（位于一个亚基的Cys77和 另一亚基的CyS109之间）[图5-26 (1)和（3)]。甘餌醉结合植物凝集素中 同样存在亚基内二硫键，但不存在亚基间二硫键。
图4-38 PhyUodulcin (1)及具非甜味同沏物Hydrangcnol (2)的化学结构图
甜蛋白最初均从植物直接提取，但这种生产方式有较多不足之处。利用基因 工程生产甜蛋白不受季节、产地等影响，是一种很宥前途的生产方法。目前这方 面的研究相当活跃，除嗦吗甜、莫奈林这方而的研究成果显著外，其他甜蛋白利 用基因工程生产也在进行中。如美国Nek丨ar Worldwide公司已将Brazzein表达至 玉米中，丨t转基因玉米中能提取lkgBmzzein。美国生物资源国际公司正研究通 过种植和转基因方法生产Miraculin。据报道，H本Asahi Denka Kogyo公司和生 化研究所已将Curculin在转基因植物和大肠杆菌中表达。
也可以通过烟草表达莫奈林。首先合成了由噬菡体PI Cre重组酶介导的特异 ?组位点丨OXP的序列，构建了两个loxP同向重复的棺物表达栽体pGLX121. 1。 PCR定点突变了 CaMV 35S启动子元件中kozak序列，使kozak中的翻译起始密码 子ATG位于Ncol位点上。把spm基因克隆到表达载体pG〖MA的Ncol和PstI之 间，给甜蛋白8pm基因加上35S启动子和polyA及NOS终止子元件，然后克隆到 PGLX121. 1的EcoRI位点上，用农杆菌LBA4404转化烟草，获得卡那痗素抗性转 基因植株，经过PCR及southern分析，证明甜蛋白spm基因已整合到烟荩基因组 内。用转基因烟草的总RNA通过RT-PCR反转录扩增spm基因，证明了在35S启 动子及其他调控元件的控制下，spm基因在转基W烟草中转录表达出mRNA。提取 转基因烟草总蛋白，经SDS-PAGE分析，初步证明了 8pm基因在转基因烟草中表 达出目的甜蛋白。
RGal-3和另一种未知结构的产物，但得率均很低。