仁寿县果葡糖浆
将50g橙皮素加到250mL10%的氢氧化钾溶液中，室温放置30min后用10%的 钯-碳催化剂（4g)催化氢化1.5h。原料可用粗制的或直接市购的橙皮素，但以 重结晶的为好。将混合物过滤，用盐酸调节至PH7.0后，将溶液用水稀释至 600mL,加人5mL36%的浓盐酸溶液，然后快速加热至沸腾，回流2.5-2*75h。混 合物中HDG (DI)和橙皮素二氢查耳酮的比例大约为1:1。油状的反应混合物冷 却后可用4xl00mL的醚抽提，蒸发后得橙皮素二氢查耳酮16g (熔点1981)。 提取余液（带有一定的油牲）罝于冰箱中可得到纯净的橙皮素二氢查耳 酮-D-葡萄糖苷（II) 10. 3g，再用31%的乙酸乙酯抽提水溶性滤液， 可得1.5gHDG。HDG的甲醇结晶体呈无色针状，熔点119 - 121T：。用a - L -鼠 李糖苷酶水解除去鼠李糖后得率更髙，但不太方便。
④甜菊轉分布于体内各组织中并通过输送胆汁导管以结合形式进入粪便中 最后排出体外。
同理可计算出，引起受试动物半数致死的最大剂萤是人体可能摄入量的 10000倍以上。
KJM 性酶切点缩写：Af = 4/ B ; B = BamH I ； C = Clo I ； E : EcoR I ； H = Hind IB； Hp = W/w I : P = Pst I ； Pv = Pm 0 ; R V = EcoR V ; S s Sa n ; Sc = Sac I ; Sc D = Sac D ; X = Xba I ； XhnXho I 0
要在酵母中表达嗦吗甜，首先要合成相应的基因。为使基因能在酵母中高效 表达，采用酵母优选密码子合成嗦吗甜I基因，为便于操纵DNA序列，在嗦吗 甜基因设计时在序列中包含多个限制性酶切点。嗦吗甜I基因长度为630bP,它 的DNA序列的5'端和1端分别为Bel I位点和Xho I位点。嗦吗甜I合成基因经 直接定点突变或DNA片段替换合成嗦吗甜A、B基因。将嗦吗甜I基因113位 的天冬酰胺的密码子替换为天冬氨酸的密码子即得嗦吗甜A基因序列，随后将 嗦吗甜A基因46位的天冬酰胺的密码子替换为赖氨酸的密码子即得到嗦吗甜B 基因。
{二）三氮蔗糖的稳定性
酵母分泌嗦吗甜，是生产嗦吗甜另一种方法。植物嗦吗甜也由分泌产生，因 此可以模拟植物嗦吗甜的产生过程进行酵母嗦吗甜生产。而且植物和酵母的胞内 环境及输出蛋白折香、形成二硫键的细胞机制相似，因此可以推断分泌的嗦吗甜 也将具有甜味构型。将嗦吗甜丨、A、B的基因分别接在一密码序列的1末端， 该密码序列引导嗦吗甜进人细胞膜分泌途径，并最后分泌到培养基。
该转糖苷反应中，底物KU浓度及反应时间对转化率的影响见表4-13、图4-20。RU浓度较低时，RU-F合成速率较高，RU的转化率（RU-F/RU)在 反应初期达到最大。RU浓度0.025nu)l/L时，反应lh,达到最大转化率88%。 RU的转化率随RU浓度上升而下降，RU浓度0.5mol/L时，反应20h,转化率 为19%。S、RU的结果类似。S浓度0.025mol/L时，反应0.5h后转化率达 到 80%。
七、阿斯巴甜的安全毒理学分析