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正宁县甘草甜素

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正宁县甘草甜素

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多点结合甜味理论1991年,Tinti & Nofre提出了著名的多点结合甜味理论(the Multipoint Attachment Theor) ) 0该理论认为,人体甜味蛋白受体最少包含八个基本的识別 部位,这些识别部位与甜味分子相应的结合部位发生相互作用,从而产生甜味 刺激。
马模榔(Mabinlin)是从我国云南产白花菜科(Capparidaceae)植物Capparis masaikai Z^/种子中提取出的甜味蛋白质,其甜味特性类似于嗦吗甜或奠奈林, 但甜度要低些。据报道,我国云南产区的儿童有咀植物种子的习 惯,以获得甜味刺激。到目前为止,尚未对马槟榔或?种子进行过系 统的药理学研究,虽然后者是我国的传统中药,有止咳化痰和避孕的作用。
基于Searle公司的开拓性工作,Ariyoshi提出L -天冬氨酰胺的甜味模型理 论,这个酰胺是用具有合适立体构象的小基团R,和大基团K2进行《-取代的。 通过对这种模型的改进,发现刚性带有适当分支的R2基团能明显提高化合物的 甜度。所有的高效甜味剂(甜度大于蔗糖的1000倍)至少有一个酯基或酰胺基 团作为R,或R2,而且肽键上不能有取代基。天冬氨酰残基可通过氨基的酰化作 用来改性,这样有时会产生非常甜的化合物。
根据甜味三角理论,A和B是空间相距0.25 -0. 40nm的带负电荷的两个原 子,其中A与带正电的质子结合成为AH。AH在整体上可以是酸,B为质子受 体,可认为是碱。一个甜味分子中的AH、B系统可和位于甜味蛋白受体上另一 个合适的AH、B系统进行氢键结合,形成双氢键复合结构。甜味分子和甜味蛋 白受体的复合反应虽然没有生成新的产物,但它却引起一个依靠神经冲动传递的 甜味刺激,两者间的复合强度决定了甜味刺激强度即甜度。
这是英国Tate & Lyle公司提出的新方法,首先利用芽孢杆菌属的菌株在 30T下发酵Glc,生成葡萄糖G-6-a (葡萄糖-6-乙酰酯),采用甲醉抽提及 硅胶柱层析分离相结合的方法提纯。然后G-6-a与蔗糖的混合物,在由枯草 杆菌产生的分-果糖基转移酶的作用下,生成S-6-a,采用层析分离的方法可 分离出70%纯度的S-6-a。将之与Vilsmeier试剂反应对4、1\ 6,三个羟基进 行选择性氣化后,再经脱乙酸基反应即得到终产物三氣蔗糖。
(1 )采用 土 chrysogenum 的 B2 培动子(2)采用 P. chrysogenum 的 pcbC 启动子 (3) /l.rjwamori 的 gdhA 肩动子(4) /!? n/rfuimM 的 gpdA 启动子
大多数转葡糖基反应采用均匀酶反应体系,以可溶性淀粉或环糊精作为 葡糖基供体,葡糖基供体、受体均在溶液中,因此产物分离困难,并且反府 生成大童非目的还原糖。若以不溶的原淀粉为葡糖基供体,利用残留淀粉的 不溶性可以简化产物分离纯化工序,但原淀粉具有紧密的晶体结构,W此转 葡糖基反应速率和得率都很低。对原淀粉经挤压膨化处理后能以溶胀状态息 浮在水中,得到的反应体系与原淀粉相似,但反应速字和得率都比原淀粉反
由于各甜蛋白间只存在一些三肽序列相同,且它们连接抗体后就丧失了 甜味或变味特性,W此另外一些研究人员猜测一些氨基酸拉伸后参与形成能 被味觉识别器识别的结构。根据报道,仙茅蛋白分別和莫奈林、奇异果素和 嗦吗甜有2个、5个和6个相同的三肽,但免疫印迹分析结果表明,仙茅蛋 白的抗血淸只与奇异果素发生微弱的反应,而与嗦吗甜、莫奈林不发生反 应。假定这些推测的三肽是在分子表面,则它们应存在于5个完全铩露在表 面的环中:11 ~丨4、46~51、66 ~ 70, 76 -78, 106 ~ 109 0这些氨基酸序 列明显与没有甜味和变味特性的GNA不同。特别是,属于11~14、46~51 和66 ~70的氨基酸非常接近(1.50~1.60mn),能够构建一个一般的抗原 决定子(common antigenic determinant),它能使味觉接收器失效。另外,多 肽链折叠后,仙茅蛋白的AsP71和Tyi65靠近并暴寐在表面,并且形成一个 类似于阿斯巴甜的味点。
Kohimira等通过固相合成法,分别人工合成莫奈林的A链、B链,然后将二 者组装成有甜味活性的莫奈林,其甜度是蔗糖的4000倍。同时,在不改变莫奈 林的天然构象的条件下,对A链和B链上具有竣基的氨基酸残基进行替换,合 成了一些奐奈林类似物,与人工合成的莫奈林的甜度相比较,对莫奈林的功能进 行了一系列的研究。结果发现:[Atm^GlnWAs,] - [ ASN^Gln ^0]-莫奈 林、[AsnW9Gln _]-莫奈林的甜度分别是蔗糖的550倍、4000倍。这说明:莫奈 林A链上第22、26位的Asp和第25位的Glu均不参与甜味受体的结合,但被替换 后能造成甜度的下降。[AsnAUS]-、[Asn^], [Gln^25] -、[ Asn"26 ]-莫奈林的甜 度分別是蔗糖的7500倍、750倍、2500倍和5500倍。

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