眉山市海藻糖
4.对甜味分子空间结构要求的设想由于甜味感觉对底物的要求可以是小如CHC13分子，到大如多肽和大分子蛋 白质，因此可以认为，甜味化合物和甜味蛋白受体之间最初的相互作用，发生在 受体表面部分。对于那些与受体之间无疏水接触的甜味剂分子，由于这种表面吸 附之间的作用力相对较低，故其甜度也低，这也许就是糖和糖醉均不是很甜的原 因。对于那些与受体之间有一处或多处疏水键合的甜味剂分子，除了在AH、B 基闭上的两点接触外，更包含有空间上的疏水键合，这种更深层次的键合则很可 能发生在甜味蛋白受体中类似酶活性位点的“嵴”或“裂缝”中。
通过研究不同预培养时间下，CYH抗性细胞和活细胞的增加量来确定最优 预培养时间。随着培养时间增加，活细胞和CYH抗性细胞增加，但CYH抗性细 胞的增加速率比活细胞快，转化体和活细胞数之比在6h内一直增加，但更长的 培养时间对转化体与活细胞数的比例影响不明显（图5-17)，这表明6h内CYH 抗性基因已完全表达了。
在设计三氧蔗糖的制备过程中，首先要选定一个蔗糖C-6位羟基被保护的 反应中间物，该中间物要求位于蔗糖C-4、1\ 6,位上的羟基可以被选择性氣 化，而其他位置上的羟基则不是很活泼。如前所述，最常用的保护法包括醚类、 缩醛（酮）类和酯类3类。单独保护蔗糖C-6位上伯羟基，最适用的方法是酯 类保护法，因为它兼具引人方便、在所葙反应条件下稳定以及易于除去等优点。 在酰化反应中，能使生成的蔗糖酯对氣化试剂稳定、最后易于水解除去的任何酰 化试剂都可以使用，通常选择相应酸的活泼衍生物作为酰化试剂，其中最常用的 是酰基酐或酰基卤。对蔗糖来说，形成乙酸酯或其他羧酸酯娃最有效的保护醇羟
<130*0 Sun等人成功地在转基因莴苣中获得了重组奇异果索，首次从外源宿主获得 具有生物活性形式的奇异果素。编码奇异果素的cDNA是用R duUifica果肉中的 所有RNA合成的，并被克隆于植物表达载休——PBI121或pBE2113-GUS。载 体pBI121和pBE2113-GUS都含有CaMV35S启动子、胭脂碱合成酶（nos)启 动子和终止子。此外，PBE2113-GUS载体中还含有带翻译增强子（E12-35S- H)的启动子盒。所有这些都被引人A 菌株GV2260。通过感染带载 甘草的甜味成分主要是甘草甜素（Glycyniiizin)即甘草酸（Glycyrrhizic acid), 比蔗糖甜50 ~ 100倍。甘荩甜素是一种三萜系列皂角苷，其糖苷配基连接在糖分子 上。在糖苷配基的C-3原子上连接有2个分子的葡萄糖醛酸，便成为甘草亭酸 (Glycyrrhetinicacid)。甘草亭酸经水解可分解成糖苷配基（甘草甜）和糖分子。图 4-33所示为甘草酸和甘草亭酸的化学结构‘。 使用产物沉淀法，当L - PheOMe过贵时在水溶液反应也能有很髙的得率， 其中Z - L - Asp - L - PheOMe与L - PheOMe形成不溶性沉淀。各取底物 2?10mL水中混合，并加人10mg嗜热菌蛋ft酶，起始pH6~8，在 概保持3 ~5h可得到Z-L-Asp-L-PheOMe ? L - PheOMe白色沉淀，该沉淀 得率大于95%。研究还发现，以外消旋化合物为反应底物时，只有L-PheOMe 参与缩合反应得到产物为Z-L-Asp-L-PheOMe，但D - PheOMe也能与Z-L- Asp-L-PheOMe形成沉淀。根据这些研究结果，Tosoh公司开发了生产工艺流程 (图2-20)，并在1984年完成了中试。 E8,播/】丨丨?专—?性熟化切动子（toinalo fmit - ripening specific promoter)； 根据图3-31可知，低温长时间反应有利于S-6-a的形成。但当反应时间 大于6h时，“相对S-6-a值”增长缓慢，继续延长时间对反应对提髙S-6-a 得率并无明显效果，因此选择6h为最佳反应时间。