光泽县阿力甜
受试人或动物的种类不同，由环己胺引起的睾丸萎缩中毐现象也是有差别 的。它对大鼠的中毒现象最明显，给较幼小的大鼠以200mg/kg水平喂养90(1或 更长时间就出现了轻微的中毐现象。以150mg/kg和175rng/kg水平进行试验结 果一样。但以最大剂萤300mg/kg水平喂养小鼠并没发现睾丸萎缩现象。对大鼠 来说，最主要的代谢途经是通过脂肪羟基化作用，保持了氨基，但对小鼠来说， 代谢是以脱氨基作用结束的。在小鼠尿中泌尿系统总代谢产物中，环己醉及其共 轭化合物占相当一部分比例，其余的是环己基-1, 2-二醇，而人体的主要代谢 产物正是环己基-1, 2-二醇。比较环己胺对哨齿动物和人体的有关代谢试验结 果，发现小鼠的毒理试验结果比大鼠更接近于人类。
甘草酸主要存在于甘草的主根部，侧根部的含最较低，在绿色部分的含量为 零。在不同的商业化种植的甘草中，其甘草甜素的含里也不同。这些差异是由于 植物的种类不同、种植方式不同和分析方法不同而引起的。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
E8,播/】丨丨?专—?性熟化切动子（toinalo fmit - ripening specific promoter)；
因此，甜味的蛋白质受体对甜味分子，尤其是含有强疏水性取代基团的甜味 分子，具有空间结构的要求。这种要求是由蛋白质受体的空间结构所决定的，例 如甜味分子AH、B、X生甜团的构象必须呈顺时针排布可能就是这种空间结构 的要求之一。而实际的空间要求要比这复杂得多，也丰富得多。可惜的是，作为 甜味受体的蛋白质分子至今仍未被成功分离出来，因此这个设想只能等到甜味受 体蛋白质分子的结构被弄清楚后才能得以最终证实。
(-)三氣蔗糖的甜味特性
1983年5月4 ~6日，聚集在Duke大学医科中心的世界许多科学家们对糖 精的安全性问题进行了最权威的评价。科学家们认为：
通过转基因莴苣和番茄均可生产莫奈林，但两者植物所使用的启动子并不相 同。在转基因番茄表达使用的是E8启动子，这种后动子是可定向使莫奈林基因 在番茄中表达的水果专用启动子。而在转基因莴苣中表达则使用CaMV启动子， 这种启动子在许多植物器官中都具有活性。把含有莫奈林带E8启动子或CaMV 启动子的基㈥引入中即可。蛋白质从西红柿果皮或莴苣叶中提取。 对提取的蛋白质做western印迹分析和EL1SA,结果表明，在带有E8启动子和莫 奈林基因的转基因西红柿果实和带有CaMV启动子和莫奈林基W的转基因莴苣叶 中均可检测到重组莫奈林。用乙烯处理转基因两红柿，可使西红柿果皮中莫奈林 的产谊提高至23.9?^丨鲜重，诚著高于未经乙烯处理的转基因番茄。
通过对各种卤代脱氣蔗糖构效关系的研究和比较，可以总结出如下几个 规律：
甘草原是蝶形花科(Fabaceae)的一种野生植物g/aZ>ra L* ,生长在 近水的深层沙质土壤中，现大多为人工种植。较好的种植季节是3月，种植后的第 三或第四年丨0月，当叶子脱落时，即可挖出其根茎，冲洗后在空气中自然干燥 4~6个月（剥皮和不剥皮均可），然后捆扎运到加工厂。通过热水处理甘草的根茎, 并经澄清、浓缩最终制得甘草甜素。商业化产品有团块状、颗粒状和黏稱状等等。