鄂温克族自治旗安赛蜜
Osladin 是 1971 年由 Herout 等人从水龙母科（Polypodiaceae)植物 Polypodi- am vulgare L提取出的一种皂角苷，甜度为蔗糖的3000倍。与Osladin结构相似 的 Polypodosides A 和 B，则是从水龙骨科植物 Polypodium glycynhiza D. C. Eaton 的根状茎中分离出的。这种植物产于北美洲，俗称“甘草蕨” （Ucorice fem)。 Polypodosides A楚P. glycynhiza的主要甜味成分，在糖苷配基C - 3位上连接1 个新橙皮糖（2-0-a-S-P比喃鼠李糖基-芦-S-n比喃木糖）单元。Polypodosides A的糖苷配基与OsUdin糖苷配基的厶〃-衍生物相?致。
素，-/3 -甘草亭酸-—^3 -脱氧-18 -/3 -甘草亭酸L3 -表-18 -甘
C.ti/而的基因组的DNA文库中分离得到3-磷酸甘油醛脱羧酸酶（GAP)基 因，其DNA序列测定后发现有一 1005hp的ORF片段0从C. utUis中得到的 GAP基㈥克隆至6.5kh ￡co/U片段。起始密码子上游的Ikb片段（-976? -1，推断+丨为翻译起始位点）作为启动子，用引物在V端加上N?d位点， 在3'端加上Xbal和BamHI位点。终止密码子下游0.7kb片段（+ 1006? + 1728)作为终止子，用引物在V端加上BamHI位点，在V端加上Pst丨位点， 将两片段在pBluescript SK的No丨丨和Pst丨位点间连接，构建得质粒pGAPPTIO (图5 - 15)。含单链莫奈林的0RF的0. 3kb的Dral - Bgl D片段插至pGAPPTIO 的平头Xbal位点和BamHI位点之间构建得PGAPM3。含rDNA片段的表达质 粒如下构建：从pCLRE2 (图5-14)中分离得到的含部分rDNA的1.2kb Apal 片段插至pBluescript SK的Apal位点构建得质粒pCRAl。在pCRAl的Xhol切 割平头端连接上Sphl连接体构建得pCRA2，在pCRAl的Asp7丨8切割平头端 连接上Notl连接体构建得pCRA3。pCRA3的1.2kh rDNA切割为0.5kb和 0. 7kh Notl - Bgl n片段后连接到质粒pUCBgl的Bgl n位点，构建得质粒 pCRA10o其中质粒pUCBgl由pUC19经EcoRI和HindHI酶切，并在Klenow酶 切处理后在切点处连接Bgl D连接体构建得到。质粒pCRA2经Sphl和EcoRI 酶切后，与由PCLRE16分离得到的含CYH抗性基因的1. Ikl, Sphl - KcoRI片 段连接构述得pCLR216。质粒pCRAlO经Xhol和Ps丨I酶切后，与含CYH抗性 基因的丨.1比？311-5&丨1片段（-184?+974)连接，构建得到pCRALll。从 PGAPM3分离得到的含莫奈林表达盒的2. Okb Notl - PstI片段插至pCLR216的 Notl和PstI位点构逑的质粒PCLRM216 (图5 - 16),插至pCRALl 1的Not丨和 PstI位点间构建得到质粒pKMll (图5-16)。C. W/is的URA3基因经与 的ura3突变子减基互补克隆得到，用作整合目标。URA3的801bP ORF 的 区域（+4?+356)和 3'区域（+356 ~+685)分別为 SaH-Bgin 和Bgl丨丨-AsP718片段，这两个片段插至pUC19的Sail和AsP718构建得质粒 pURAl0在pURAl的Hindffl酶切端和Asp718酶切平头端加上Not丨连接体分 别构建得到pURA2和PURA3。从pURA2的5,端分离得Noll - Bgl H片段，从 PURA3的1端分离得BglD - Notl片段，两片段连接至质粒pUCBg丨的Bgin位 点构建pURAlO。含CYH抗性基因的1. lkb PstI - Sail片段插至pURAlO的Sail 和PstI位点间，构建得pURALl 1。含莫奈林表达盒得2. Okb的Notl - PstI片段 插至pURALll的1^11和？8|丨位点间构建质粒pUMll (图5-16)。
除了在食品中的应用以外，安赛蜜还用在口腔卫生制品及药品的增甜上。牙 音和口腔类产品通常由于添加表面活性剂而带来苦味，因此需用些香料和甜味剂 来掩盖。由于安赛蜜甜味作用快，特别适合用在这些口腔卫生制品上，它可和通 常用在牙音和口腔淸洁剂上的香料相媲美。对于化妆品，如果对香料浓度要求不 严格的话，要使安赛蜜快速作用，则要求香料组分浓度适当低些3正如前述，安 赛蜜很适合与山梨糖醇混合使用，而山梨糖醇则常用在牙裔上。若用甘油作湿润 剂和增白剂，也不存在溶解困难的问题。虽然安赛蜜在纯乙醇中溶解度很小，但 安赛蜜作为要溶于含酒精的口腔淸洁剂的配料中也未遇上闲难。在乙醇-水混合 液中，安赛蜜的溶解度通常要比口腔淸洁剂浓溶液中的大。
在反应混合物中加人一定虽：的水，不仅能降低低熔点混合物的熔点，同时 还能够使酶溶解在其中。图2 -65反映了混合物中含水萤对反应产率的影响， 反应产率随含水萤的增加而增加。在含水最较低时，由于不能很好形成低熔点 混合物而影响了反应的进行。当含水萤超过12%后，反应产率的上升幅度趋 于平缓含水■(—)/%m 2 -65混合物含水*对产率的影响 注：其中苄氣羰基-L-天冬氨酸二乙期和D-丙氨酰胺分别加入0.5mmo丨，^-狹凝乳蛋卩丨酶浓 度为丨5% 37*C下反应8h。
纽甜也可使某些食品和饮料的风味增强，尤其是酸迆水果风味（如橘子、 柠檬和葡萄）和樱桃风味。与阿斯巴甜不同的是，纽甜与安赛蜜、糖精之间都 没冇甜味协同增效作用图2-46 在水溶液中蔗糖与纽甜之间的等甜度浓度关系
在第三种机理中，刺激物分子不可逆地进入接近离子载体的“有序排列队” (orderly queue),这条排列队的物理长度决定了持久性。三种机理中前部分离子 载体阶段与第二种机理相同。
图5-21 MCL的三维分子模型 Cy8*Hi?残基都以棍状阁表示。在图中，C表示CyB，H表示HU。
由于水分、pH和温度的综合影响导致阿斯巴甜的分解，会引起甜味的逐渐 丧失。但这不会产生怪味，W为其转化物均无味。图2-8 ~图2-11所示分别 为阿斯巴甜在PH4.5、3.7、3. 2和3.0溶液中的稳定性。