过髙浓度的纽甜可降低膳食的可口性（尤其是对大鼠和小鼠而言），试验动 物在体重高峰期间，与对照组比较时出现了轻度、持续地食物消耗减少（图 2-53)。而在一个较大的纽甜剂量范围内，动物的食物消耗量减少、体重降低 和体重增长减慢没有剂量依赖关系（图2-54)。这类与膳食的可口性有关的影 响在其他物质的毒理学试验中同样可以观察到（包括具有很觅味逬的其他非营 养类增甜剂），并非是纽甜所独有的。当一种的食物具有充足的营养，但是可口 性变差时，动物只吃少量食物仍会保持适当的营养。因此当大鼠面对可口性较差 的食物，它们仍会食人少量：，这种由于摄人食物减少所导致体重改变的现象并不 是副作用。然而，这种情况对安全性试验的结果有不利影响，因此食物的可口性 在安全性试验中是一个重要的考虑因素。
在饱和乙酸乙酯缓冲液中，由嗜热菌蛋白酶催化合成Z-Asp-PheOMe的反 应动力学可表示为 Z-Asp (ZA)、PheOMe (PM)、Z - Asp - PheOMe ( ZAPM) 的快速平衡机理，满足Michaelis-Memen动力学，其中Z - A叩对酶活力部位的 双侧均有亲和力，PheOMe除进行酶促反应外，同时还以?级反应速率进行非酶 促分解。ZAPM、ZA和PM浓度变化引起的结果如式（2-19)-式（2-21) 所示
(二）Brazzein的甜味活性中心
除天然物外，Hemaruhilcin也可通过合成法制得。以两种酮类化合物为原 料，通过3 -羟基丁醛缩合作用可直接制得外消旋的Hernandulcin。研究表 明，一旦改变了 Hernandulcin的功能因，甜味随之丧失。Hernandulcin分子 中C-厂羟基团和C-丨羰基闭，分別是Shallenberger甜味模型中的AH和B 生甜闭。除此之外，C-4与C-5,之间的双键是该化合物维持甜味的第三个 关键基团。
乳糖、RU浓度及反应时间对产物的影响见表4-21。随着底物浓度的增加， RGal-1、RGal-2、RGal -3的数量略有增加。RGal - 1主要在反应起始阶段 (1.5h)形成，然后迅速下降，下降同时形成RGal-2，反应结束时有少最 RGal-3形成。
一、甜叶悬钩子苷
环糊精葡糖基转移酶(CGTase)能将淀粉或环糊精的葡糖基经转葡糖苷作 用转移给其他糖元，因此，可用它催化淀粉或环状糊楮在甜菊苷的糖基上引入新 糖元。转葡糖基反应分2步进行：①由淀粉合成环糊精；②从环糊精转移葡糖 基至受体物质。
为确定变性酵母嗦吗甜能否在体外折奋成甜味构型，先对已被还原的变性植 物嗦吗甜进行折叠复性预备试验。植物嗦吗甜分子中有8个二硫键（图5-1), 因此稳定性很好，但同时也使其还原和复性都很闲难。Ellman’s试剂[5, 5# - dilhiohis - (2 - nitrobenzoic acid)]的二硫键还原过验证实了植物味吗甜的二硫 键对还原作用很稳定：2个稳定的二硫键需在37弋、PH9、8moI/L尿素中经 50mm?l/L (3 -巯基乙醉作用2h才能完全被还原。
图2-41常见风味物质中的主要醛荜化合物(I)香兰素（R=CH3)和乙基香兰素（R=C2H5)(香草）(2)灼桂》(肉桂> (3)笨中搭（櫻桃和苦杏仁）（4)柠檬搭（柠襻>
由于Bntzzdn独特的科研和产业应用价值，大蛩生产高纯度的Brazzein成为 产业界的目标。Brazzein在天然植物中含量甚微，提取困难，产最受到限制。因 此利用基因工程，在其他宿主中表达该外源基因是快速冇效的途径。美国Nektar Worldwide公司已将Brazzein表达至玉米中，It转基因玉米中能提取1kg Brazzein。 另也曾尝试在酵母中表达合成Brazzein，但没有成功。这里讨论用大肠杆菌表达 Brazzein 基因。